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    動物源性食品中細菌的檢測——肉毒梭菌

    時間:2021-07-20    點擊: 次    來源:中國獸醫發布    作者:曲志娜 趙思俊等 - 小 + 大

    肉毒梭菌(Clostridiumbotulinum)是一種生長在缺氧環境下的細菌,在罐頭食品及密封腌漬食物中具有極強的生存能力,是目前毒性最強的毒素之一。肉毒梭菌是一種致病菌,在繁殖過程中分泌毒素,這種毒素是毒性最強的蛋白質之一。軍隊常常將其用于生化武器。人們食入和吸收這種毒素后,神經系統將遭到破壞,出現頭暈、呼吸困難、運動神經麻痹和肌肉乏力等癥狀。該菌為腐物寄生菌,在自然界中分布廣泛,在土壤、海洋或湖泊的沉積物,動物的腸道中??蓹z出,偶亦存在于動物糞便中。檢驗食品特別是不經加熱處理而直接食用的食品中有無肉毒毒素或肉毒梭菌(例如罐頭等密封性保存的食品)至關重要。

    1 病原學特征

    1.1 形態和染色特性

    肉毒梭菌屬厭氧性梭狀芽孢桿菌屬,為(0.3~1.2)μm×(3~20)μm的大桿菌,不同代謝群菌株的大小有差異,單獨或成雙排列,有時可見短鏈狀。新鮮培養基的革蘭氏染色為陽性。具有該菌的基本特性,即厭氧性的桿狀菌,為多形態細菌,兩側平行,兩端鈍圓,直桿狀或稍彎曲。肉毒梭菌具有4~8根周毛性鞭毛,運動遲緩,無莢膜。有芽孢,芽孢比繁殖體寬,呈梭狀,芽孢橢圓形,大于菌體,位于次極端,使菌體似網球拍狀,或偶有位于中央,常見很多游離芽孢。當菌體開始形成芽孢時,常常伴隨著自溶現象,可見到陰影形。

    1.2 培養和生化特性

    肉毒梭菌專性厭氧,對溫度的要求因菌類不同而異。一般最適生長溫度為30~37℃,多數菌株在25℃和45℃也可生長。產毒素的最適溫度為25~30℃。培養基的最適pH為6.0~8.2,pH8.5可抑制其生長。該菌對營養要求不高,在普通培養基中均能生長。肉毒梭菌的生化性狀很不規律,即使同性,也常見到株間的差異。

    在固體培養基表面上,形成不正圓形、1~6mm的菌落,扁平或稍隆起。菌落透明或半透明,表面呈顆粒狀,邊緣不整齊,界線不明顯,向外擴散,呈絨毛網狀,常常擴散成菌苔。在血平板上,出現與菌落幾乎等大或者較大的溶血環。在乳糖卵黃牛奶平板上,菌落下培養基呈乳濁狀態,菌落表面及周圍形成彩虹薄層,不分解乳糖;分解蛋白的菌株,菌落周圍出現透明環。能消化肉渣,使之變黑,有腐敗惡臭。液化明膠。產生硫化氫,不形成吲哚。

    1.3 抵抗力

    該菌繁殖體抵抗力中等,80℃經30min或100℃經10min能將其殺死,但肉毒梭菌芽孢的抵抗力極強,在動物尸體、骨頭、腐爛植物、青貯飼料和發霉的青干草中能存活6個月以上,能耐受煮沸達5h,10%的鹽酸能于1h內、20%的甲醛能于24h內將其殺滅。

    肉毒毒素對酸及消化酶都有很強的抵抗力,在pH為3.6~8.5時不被削弱。在動物尸體、骨頭、腐爛植物、青貯飼料和發霉的青干草中毒素能保持數個月,但80℃經30min能使之變性,0.1%高錳酸鉀也能破壞其毒性。

    1.4 抗原性

    根據所產生毒素的抗原性不同,肉毒梭菌分為A、B、C、D、E、F、G這7個型,其中C型又分為Cα、Cβ。能引起人類疾病的有A、B、E、F型,其中以A、B型最為常見。

    2 流行病學特征

    肉毒梭菌芽孢廣泛存在于自然界中,土壤為其自然居留場所,動物胃腸道內容物、糞便、腐敗尸體、腐爛飼料及各種植物中都含有。這些芽孢在適宜的條件下能繁殖產生外毒素。A、B、E、F型毒素是人肉毒梭菌中毒的最普遍原因,C型和少數D型只引起人以外動物的肉毒中毒。B型主要見于歐洲和北美洲東部,A型主要見于北美洲西部,E型主要見于歐洲中部、俄羅斯、日本和加拿大。肉毒梭菌在自然界的分布上具有某種區域性差異,顯示出生態上的差別傾向。A、B型的分布最廣,其芽孢廣泛分布于自然界中,各大洲的許多國家均有檢出;C、D型的芽孢一般多存在于動物的尸體中,或在腐尸附近的土壤中;E型菌及其芽孢存在于海洋的沉積物、水產品的腸道內,E型菌及其芽孢適應于深水的低溫,使E型菌在海洋地區的分布廣泛。但是越來越多的調查結果表明,除G型菌之外,其他各型菌的分布都是相當廣泛的。

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